3M Molecular Detection Assay 2 - Campylobacter MDA2CAM96, 96 tests, 1 ea Bruksanvisningar

Sidan laddas ...

70

3

Datum för utgåva: 2019-01

Produktinformation

Molecular Detection Assay 2 - Campylobacter

Produktbeskrivning och avsedd användning

3M™ Molecular Detection Assay 2 - Campylobacter används med 3M™ Molekylärt Detektionssystem för snabb och

specik detektion av Campylobacter jejuni, Campylobacter lari och Campylobacter coli i prover från anrikade livsmedel

och livsmedelsbearbetningsmiljöer.

3M Molekylär Detektionsanalys använder LAMP-teknik (Loop-Mediated Isothermal Amplication) för att snabbt ampliera

nukleinsyrasekvenser med hög specicitet och sensitivitet kombinerat med bioluminiscens för att detektera amplieringen.

Presumtivt positiva resultat rapporteras i realtid medan negativa resultat visas när analysen har slutförts. Presumtivt

positiva resultat bör bekräftas med hjälp av egen vald metod eller som speciceras av lokala föreskrifter

(1,2)

.

3M Molecular Detection Assay 2 - Campylobacter är avsedd för användning i laboratoriemiljö av yrkespersoner som

är utbildade i laboratorieteknik. 3M har inte dokumenterat användningen av denna produkt inom andra industrier än

livsmedels- och dryckesindustrin. 3M har exempelvis inte dokumenterat produkten för testning av läkemedel, kosmetika,

kliniska prover eller veterinärprover. 3M Molecular Detection Assay 2 - Campylobacter har inte utvärderats med samtliga

möjliga livsmedelsprodukter, livsmedelsbearbetningsmetoder, testprotokoll eller bakteriestammar.

Precis som för alla testmetoder kan källan till, beredningen av och kvaliteten på anrikningsmedlet påverka resultaten.

Faktorer som provtagningsmetod, testprotokoll, provpreparering, hantering och laboratorieteknik kan också påverka

resultaten. 3M rekommenderar att metoden, inklusive anrikningsmedlet, utvärderas i användarens miljö med tillräckligt

många prover av särskilda livsmedel och mikrobiella utmaningar för att säkerställa att metoden uppfyller användarens

kriterier.

3M har bedömt 3M Molecular Detection Assay 2 - Campylobacter med 3M™ Campylobacter Enrichment Broth och den

blodfria Bolton Enrichment Broth.

3M™ Molekylärt Detektionsinstrument är avsett att användas med prover som har värmebehandlats under analysens

lyseringssteg, vilket är utformat för att förstöra organismer i provet. Prover som inte har värmebehandlats korrekt

under analysens lyseringssteg bör betraktas som en potentiell biologisk fara och ska INTE föras in i 3M Molekylärt

Detektionsinstrument.

3M Food Safety är certierat enligt den internationella standardiseringsorganisationen (ISO) 9001 avseende konstruktion

och tillverkning.

3M Molecular Detection Assay 2 - Campylobacter testsats innehåller 96 tester, som beskrivs i tabell 1.

Tabell 1. 3M Molekylär Detektionsanalys-kitkomponenter

Artikel Identikation Antal Innehåll Kommentarer

3M™ Lyseringslösning (LS)

Rosa lösning

igenomskinliga rör

96 (12 remsor om

8rör)

580 µl LS per rör

I ställ och klara

att användas

3M™ Molecular Detection

Assay 2 - Campylobacter

Reagensrör

Lila rör

96 (3 påsar,

innehållande 4 remsor

om 8 rör)

Specik frystorkad

amplierings- och

detektionsblandning

Klara att

användas

Extra lock Lila lock

96 (12 remsor om

8lock)

Klara att

användas

3M™ Reagenskontroll (RC)

Genomskinliga rör

medknäpplock

16 (2 påsar om

8enskilda rör)

Frystorkad

kontroll-DNA,

amplierings- och

detektionsblandning

Klara att

användas

Den negativa kontrollen (NC), som inte medföljer i satsen, är ett sterilt anrikningsmedium, t.ex. 3M Campylobacter

Enrichment Broth. Använd inte vatten som NC.

En snabbstartguide nns på www.3M.com/foodsafety

(Svenska)

SV

71

Säkerhet

Användaren ska läsa, förstå och följa all säkerhetsinformation i anvisningarna till 3M Molekylärt Detektionssystem och 3M

Molecular Detection Assay 2 - Campylobacter. Behåll säkerhetsanvisningarna för framtida bruk.

VARNING: Indikerar en farlig situation som, om den inte undviks, kan resultera i dödsfall eller allvarliga personskador

och/eller materiella skador.

OBSERVERA: Indikerar en potentiellt farlig situation som, om den inte undviks, kan resultera i materiella skador.

W VARNING

Använd inte 3M Molecular Detection Assay 2 - Campylobacter för diagnostisering av tillstånd hos människor eller djur.

Användaren måste utbilda sin personal i aktuella korrekta testmetoder: exempelvis Good Laboratory Practices

(3)

,

ISO/IEC 17025

(4)

eller ISO 7218

(5)

.

För att minska riskerna som förknippas med ett falskt negativt resultat som leder till utgivning av kontaminerad

produkt:

• Följ protokollet och utför testerna exakt så som beskrivs i relevant produktinformation.

• Förvara 3M Molecular Detection Assay 2 - Campylobacter enligt föreskrifterna på dess förpackning och i dess

produktinformation.

• Använd alltid 3M Molecular Detection Assay 2 - Campylobacter före utgångsdatumet.

• Bered 3M™ Campylobacter Enrichment Broth enligt dess produktinformation

• Autoklavera inte 3M Campylobacter Enrichment Broth

• Använd 3M Molecular Detection Assay 2 - Campylobacter med livsmedels- och miljöprover som har validerats internt

eller av en tredje part.

• Använd endast 3M Molecular Detection Assay 2 - Campylobacter med ytor, desinceringsmedel, protokoll och

bakteriestammar som har validerats internt eller av tredje part.

• För miljöprov innehållande neutraliseringsbuert med arylsulfonatkomplex, späd till 1:2 innan testet utförs (1 del prov

till 1 del steril anrikningsbuljong). Ett annat alternativ är att föra över 10µl av neutraliserande buertanrikning i

3M Lyseringslösningsrör. 3M™ provhanteringsprodukter som inkluderar neutraliseringsbuert med

arylsulfonatkomplex: BPPFV10NB, RS96010NB, RS9604NB, SSL10NB, SSL10NB2G, HS10NB, HS10NB2G och

HS2410NB2G.

För att minska riskerna som förknippas med exponering för kemikalier och biologiska smittorisker:

• Utför tester av patogener i ett välutrustat laboratorium under överinseende av utbildad personal. Inkuberat

anrikningsmedel och utrustning eller ytor som har haft kontakt med inkuberat anrikningsmedel kan innehålla patogener

vid nivåer som är tillräckliga för att utgöra en hälsorisk för människor.

• Följ alltid praxis för standardiserad laboratoriesäkerhet, inklusive användning av lämpliga skyddskläder och

skyddsglasögon vid hantering av reagenser och kontaminerade prover.

• Undvik kontakt med innehållet i anrikningsmedlet och reagensrören efter ampliering.

• Kassera anrikade prover enligt gällande lokala/regionala/nationella regelstandarder.

• Prover som inte har värmebehandlats korrekt under analysens lyseringssteg bör betraktas som en potentiell biologisk

fara och ska INTE föras in i 3M Molekylärt Detektionsinstrument.

För att minska riskerna för korskontaminering vid analysförberedelserna:

• Bär alltid handskar (för att skydda användaren och förhindra införsel av nukleaser).

För att minska riskerna som förknippas med exponering för heta vätskor:

• Överskrid inte rekommenderad temperaturinställning på uppvärmningsanordningen.

• Överskrid inte den rekommenderade uppvärmningstiden.

• Använd en lämplig, kalibrerad termometer (t.ex. en termometer för delvis nedsänkning eller en digital

värmeelementstermometer, inte en termometer för fullständig nedsänkning) för att kontrollera temperaturen i

3M™ Molekylär Detektion, Insats för värmeblock. Termometern måste placeras på anvisad plats i 3M Molekylär

Detektion, Insats för värmeblock.

OBSERVERA

För att minska riskerna för korskontaminering vid analysförberedelserna:

• Byt handskar innan reagenspelletsarna vätes.

• Användning av sterila pipettspetsar med aerosolbarriär (ltrerade) för molekylärbiologiskt bruk rekommenderas.

• Använd en ny pipettspets för varje provöverföring.

• Följ god laboratoriesed vid överföringen av provet från anrikningsröret till lyseringsröret. För att undvika kontaminering

av pipetten kan användaren välja att lägga till ett mellanliggande överföringssteg. Exempelvis kan användaren föra över

(Svenska)

SV

72

varje anrikat prov till ett sterilt rör.

• Använd en arbetsstation avsedd för molekylärbiologi med bakteriedödande lampa om sådan nns tillgänglig.

• Dekontaminera laboratoriebänkar och utrustning (pipetter, verktyg för att fästa och ta av lock o.s.v.) regelbundet med

en 1–5% (volym i vatten) blekmedelslösning eller DNA-borttagningslösning.

För att minska riskerna som förknippas med ett falskt positivt resultat:

• Öppna aldrig reagensrör efter amplieringen.

• Kassera alltid kontaminerade rör genom att blötlägga dem i en 1–5% (volym i vatten) blekmedelslösning i 1 timme och

på avstånd från platsen där analysen förbereds.

• Autoklavera aldrig reagensrör efter amplieringen.

Se säkerhetsdatabladet för ytterligare information och lokala föreskrifter för kassering.

Om du har frågor om specika tillämpningar eller procedurer kan du besöka vår hemsida på www.3M.com/foodsafety eller

kontakta din lokala representant eller återförsäljare för 3M.

Användaransvar

Det åligger användarna att bekanta sig med produktinstruktioner och produktinformation. Besök vår hemsida på adressen

www.3M.com/foodsafety eller kontakta din lokala 3M-representant eller -leverantör för mer information.

Vid val av testmetod är det viktigt att inse att externa faktorer som provtagningsmetod, testprotokoll, provpreparering,

hantering, laboratorieteknik och även provet kan påverka resultaten.

Det åligger användaren att vid val av testmetoder utvärdera tillräckligt många prover med lämpliga matriser och

utmaningar, för att övertyga användaren att den valda metoden uppfyller kraven.

Det åligger också användaren att fastställa att en testmetod och dess resultat uppfyller kraven från dennes kunder

ochleverantörer.

Liksom med alla testmetoder utgör inte resultat som erhållits från användning av någon produkt från 3M Livsmedelshygien

en garanti för kvaliteten hos de matriser eller processer som testats.

För att hjälpa kunder att utvärdera metoden för olika livsmedelsmatriser har 3M utvecklat satsen 3M™ Molekylär Detektion

Matris Kontroll. Vid behov kan 3M Molekylär Detektion Matris Kontroll (MC) användas för att avgöra om matrisen kan

påverka resultaten hos 3M Molecular Detection Assay 2 - Campylobacter. Testa era prover som är representativa för

matrisen, d.v.s. prover som inhämtats från olika källor, vid varje valideringstillfälle när 3M-metoden används eller när nya

eller okända matriser eller matriser som har genomgått råmaterial- eller bearbetningsändringar testas.

En matris kan denieras som en typ av produkt med särskilda egenskaper, såsom sammansättning eller bearbetning.

Skillnaderna mellan matriser kan bestå av något så enkelt som eekterna som orsakas av skillnader i bearbetning eller

utformning, till exempel rå kontra pastöriserad, färsk kontra torkad, o.s.v.

Garantibegränsningar/begränsad ersättning

MED UNDANTAG AV VAD SOM UTTRYCKLIGEN ANGES I AVSNITT OM GARANTIBEGRÄNSNING FÖR INDIVIDUELLA

FÖRPACKNINGAR, FRÅNSÄGER SIG 3M ALLA UTTRYCKLIGA OCH UNDERFÖRSTÅDDA GARANTIER, INKLUSIVE,

MEN INTE BEGRÄNSAT TILL, ALLA GARANTIER BETRÄFFANDE SÄLJBARHET ELLER LÄMPLIGHET FÖR ETT VISST

ÄNDAMÅL. Om någon produkt från 3M Livsmedelshygien är defekt kommer 3M eller dess auktoriserade leverantör att

efter eget gottnnande ersätta produkten eller återbetala produktens inköpspris. Detta är den enda ersättning som ges.

Kunden måste meddela 3M och returnera produkten inom sextio dagar efter upptäckt av misstänkt defekt. Var vänlig ring

Kundtjänst (i USA: 1-800-328-1671) eller din ociella representant för 3M Livsmedelshygien för en auktorisation avseende

återsändande av produkt.

Begränsning av 3M:s ansvar

3M KOMMER INTE ATT PÅTA SIG NÅGOT ANSVAR FÖR FÖRLUST ELLER SKADOR, VARE SIG DIREKTA, INDIREKTA,

SÄRSKILDA, TILLFÄLLIGA ELLER EFTERFÖLJANDE SKADOR, INKLUSIVE, MEN INTE BEGRÄNSADE TILL, FÖRLORADE

VINSTER. Under inga omständigheter ska 3M:s ansvar i något som helst lagrum överskrida inköpspriset för den påstått

defekta produkten.

Förvaring och kassering

Förvara 3M Molecular Detection Assay 2 - Campylobacter vid 2–8°C (35–47°F). Förvara inte i frys. Förvara satsen på en

mörk plats. Kontrollera att foliepåsen är oskadad när satsen har öppnats. Använd inte om påsen är skadad. Efter att påsen

har öppnats ska oanvända reagensrör alltid förvaras i den återförslutningsbara påsen med torkmedlet inuti för att bevara de

frystorkade reagensernas stabilitet. Förvara återförslutna påsar vid 2–8°C (35–47°F) i högst 90 dagar.

(Svenska)

SV

73

Använd inte 3M Molecular Detection Assay 2 - Campylobacter efter utgångsdatumet. Utgångsdatum och partinummer

anges på etiketten på lådans utsida. Efter användning kan anrikningsmedlet och rören till 3M Molecular Detection Assay

2 -Campylobacter eventuellt innehålla patogena material. Följ gällande branschstandarder för kassering av kontaminerat

avfall när testen har genomförts. Se säkerhetsdatabladet för ytterligare information och lokala föreskrifter för kassering.

Bruksanvisning

Följ alla anvisningar noggrant. Underlåtenhet att göra detta kan leda till felaktiga resultat.

laboratoriebänkar och utrustning (pipetter, verktyg för att fästa och ta av lock o.s.v.) regelbundet med en 1–5% (volym

ivatten) blekmedelslösning eller DNA-borttagningslösning.

Användaren måste genomgå utbildningen i driftkvalikation (OQ) för 3M Molekylärt Detektionssystem, enligt

beskrivningen i dokumentet ”Protokoll för installationskvalikation (IQ)/driftkvalikation (OQ) och anvisningar för 3M

Molekylärt Detektionssystem”

(6)

.

Beredning av medium

Bered 3M™ Campylobacter Enrichment Broth (CE250) enligt dess produktinformation. Autoklavera inte medium före

användning. Använd det beredda mediet inom 24 timmar efter beredningen. Förvara beredd buljong vid 2–8°C

(7)

,

skyddad mot ljus om den inte kommer att användas omedelbart efter beredningen. Säkerställ att mediets temperatur är

20–30°C innan användning.

Provinsamling

3M Campylobacter Enrichment Broth ska inte användas för sköljning av fåglar eller transportmedium. Samla in och

transportera prover enligt dina etablerade provinsamlingsprocedurer.

Provanrikning

I tabell 2 visas en vägledning till allmänna anrikningsprotokoll för livsmedels- och miljöprover.

Användaren ansvarar för att validera alternativa provtagningsprotokoll eller spädningsförhållanden för att säkerställa att

testmetoden uppfyller användarens kriterier.

Provberedning

a. Sköljning av kadaver och sköljningar av råa fjäderfädelar

1. Skölj en urtagen rå fjäderfäkropp med 400 ml burat peptonvatten (BPW) i en minut. Vid sköljning av råa

fjäderfädelar sköljs 1,8 till 2 kg (4 lb ± 10%) av fjäderfädelarna med 400 ml av BPW

(1,8)

.

2. För kadaver och råa fjäderfädelar ska du låta överskottsvätska droppa av innan provet sköljs för att undvika

överföring av överskottsbehandlingsvätska till provpåsen

(8)

.

3. För fjäderfä som har behandlats med Cetylpyridiniumklorid (CPC) är det nödvändigt att tillsätta 5 ml per liter

polysorbat 80 (IUPAC: Polyoxietylen (20) sorbitanmonooleat; CAS 9005-65-6) till beredd 3M Campylobacter

Enrichment Broth. Polysorbat 80 kan tillsättas till vatten före sterilisering för att underlätta upplösning eller tillsättas

till sterilt vatten före beredning av 3M Campylobacter Enrichment Broth.

4. Överför aseptiskt 30 ml sköljvatten till en steril påse och tillsätt 30 ml 3M Campylobacter Enrichment Broth.

b. Svamp för kadaver

1. Svampar bör hydreras med upp till 25 ml BPW innan provet tas

(1)

. Om proverna transporteras ska påsen vara

nedrullad och hållas vid 2–8°C.

2. Svabba fjäderfäkadavret eller samla in prov med svampen.

3. Placera svabben i en steril påse och tillsätt 25 ml 3M Campylobacter Enrichment Broth. Se till att svabben eller

svampen är täckt av anrikningsmediet.

c. Råa fjäderfädelar

1. Väg aseptiskt 325 ± 32,5 g prov och placera i en steril påse. Lägg till 1625 ± 32,5 ml BPW till de råa

fjäderfädelarna. Blanda ordentligt genom handmassage en kort stund för att skingra klumpar.

2. Tillsätt 30 ml av den råa fjäderfäproduktblandningen till en steril påse och tillsätt 30 ml 3M Campylobacter

Enrichment Broth och blanda ordentligt.

d. Rått kött och kött som är redo att ätas

1. Väg aseptiskt 25 g prov och placera i en steril påse. En lterpåse rekommenderas för att underlätta provtagningen.

2. Tillsätt 225 ml av 3M Campylobacter Enrichment Broth.

3. Massera för hand för att bryta upp klumpar och undvik att bubblor uppstår vid mixningen. Bearbeta inte påsen

genom stomachering eller blandning.

(Svenska)

SV

74

e. Skosvabbar för primärproduktion

1. Samla in prov med hjälp av skosvabbar eller strumpor i enlighet med dina etablerade provinsamlingsprocedurer.

2. Placera EN strumpa i en steril påse och tillsätt 100 ml 3M Campylobacter Enrichment Broth.

f. Dragsvabb

1. Samla prov med förfuktad insamlingsenhet enligt dina etablerade provinsamlingsprocedurer.

2. Placera svabben i en steril påse och tillsätt 100 ml 3M Campylobacter Enrichment Broth.

Inkubering av anrikning

1. Rulla ner påsen för att minimera huvudutrymmet och förhindra att exponera anrikningen luften. Massera påsen

försiktigt under ca 10 ± 2 sekunder. Bearbeta inte påsen genom stomachering eller blandning och undvik att bubblor

vid mixningen.

2. Inkubera påsen aerobt vid 41,5 ± 1°C, se tabell 2 för lämplig inkubationstid.

VARNING: Om du väljer att använda neutraliseringsbuert som innehåller arylsuonatkomplex som hydrerande lösning

för svampen måste man ha en 1:2-spädning (1 del prov i 1 del steril anrikningsbuljong) för anrikningsmiljöprovet innan

det testas för att minska riskerna som förknippas med ett falskt negativt resultat som leder till utsläpp av kontaminerad

produkt. Ett annat alternativ är att föra över 10µl av neutraliserande buertanrikning i 3M Lyseringslösningsrör.

Användaren ansvarar för att validera alternativa provtagningsprotokoll eller spädningsförhållanden för att säkerställa att

testmetoden uppfyller användarens kriterier.

Tabell 2. Allmänna anrikningsprotokoll.

Provmatris Provstorlek 3M

Campylobacter

Enrichment Broth

(ml)

(b)

Anrikningstemperatur

(±1°C)

Anrikningstid

(tim)

Volym

provanalys

(μl)

(c)

• Sköljning av kadaver

(a)

• Sköljning av

fjäderfädel

(a)

30 ml

sköljvatten

iBPW

30 41,5 22-26 20

• Svamp för kadaver

(a)

1 svamp

förfuktad med

upp till 25 ml

av BPW

25 41,5 22-26 20

• Rått kött

• Kött som är redo

attätas

25 g 225 41,5 24-28 20

• Skosvabb från

primärproduktionen

1 skosvabb 100 41,5 22-26 20

• Dragsvabb från

primärproduktionen

1 förfuktad

enhet

100 41,5 22-26 20

(a) Om fjäderfän behandlas med cetylpyridiniumklorid (CPC) måste 5 ml per liter tillsättas av (polysorbat 80; IUPAC:

Polyoxietylen (20) sorbitan monooleat; CAS 9005-65-6) till beredd 3M Campylobacter Enrichment Broth. Polysorbat

80 kan tillsättas till vatten före sterilisering eller tillsättas till sterilt vatten före beredning av 3M Campylobacter

Enrichment Broth.

(b) 3M Campylobacter Enrichment Broth ska användas inom 24 timmar efter beredning. Mediet bör ha

omgivningstemperatur (25–30°C) före användning.

(c) Innan du samlar in anrikningsprov för analys ska du försiktigt massera botten på påsen. Efter insamling av provet ska

påsen rullas ned för att förhindra att anrikningen exponeras mot luft. Ytterligare prov kan krävas för omprövning eller

bekräftande steg.

Specika anvisningar för validerade metoder

AOAC® Performance Tested

SM

(PTM) certikat #111803

(Svenska)

SV

75

I AOAC Research Institute PTM

SM

studier, 3M Molecular Detection Assay 2 - Campylobacter en eektiv metod för att

upptäcka campylobacter. Matriserna som testades i studien visas i tabell 3.

Tabell 3. Anrikningsprotokoll enligt AOAC PTM

SM

certikat #111803.

Provmatris Provstorlek 3M

Campylobacter

Enrichment

Broth (ml)

(c)

Anrikningstemperatur

(±1°C)

Anrikningstid

(tim)

Volym

provanalys

(μl)

(d)

Hela kadavret rensat i

400 ml BPW

(a) (b)

30 ml sköljvatten

i BPW

30 41,5 22-26 20

Fjäderfädel (1,8 till 2 kg)

rensad i 400 ml

BPW

(a) (b)

30 ml sköljvatten

i BPW

30 41,5 22-26 20

Kalkonkadaver

svamp

(a) (b)

1 svamp förfuktad

med upp till 25 ml

av BPW

25 41,5 24-26 20

Rå fjäderfäfärs

(325 ± 32,5 g) rensad

i1625 ± 32,5 ml BPW

(b)

30 ml produkt-

blandning i BPW

30 41,5 24-28 20

Kyckling-nuggets 25 g 225 41,5 24-28 20

(a) Om fjäderfän behandlas med cetylpyridiniumklorid (CPC) måste 5 ml per liter tillsättas av (polysorbat 80; IUPAC:

Polyoxietylen (20) sorbitan monooleat; CAS 9005-65-6) till beredd 3M Campylobacter Enrichment Broth. Polysorbat

80 kan tillsättas till vatten före sterilisering eller tillsättas till sterilt vatten före beredning av 3M Campylobacter

Enrichment Broth.

(b) Alternativt kan denna matris anrikas med 30 ml 2X blodfri Bolton Enrichment Broth (BF-BEB) i 48 ± 2 h vid 42 ± 1,0°C

under mikroaeroba förhållanden. Överför 20µl prov till 3M Lyseringslösning.

(c) 3M Campylobacter Enrichment Broth ska användas inom 24 timmar efter beredning. Mediet bör ha

omgivningstemperatur (25–30°C) före användning.

(d) Innan du samlar in anrikningsprov för analys ska du försiktigt massera botten på påsen. Efter insamling av provet ska

påsen rullas ned för att förhindra att anrikningen exponeras mot luft. Ytterligare prov kan krävas för omprövning eller

bekräftande steg.

Förberedelse av 3M™ Molekylär Detektion, Snabbladdningslåda

1. Fukta en trasa eller en engångshandduk med 1–5% (volym i vatten) blekmedelslösning för hushållsanvändning och

torka av 3M Molekylär Detektion, Snabbladdningslåda.

2. Skölj 3M Molekylär Detektion, Snabbladdningslåda med vatten.

3. Torka av 3M Molekylär Detektion, Snabbladdningslåda med en pappershandduk.

4. Säkerställ att 3M Molekylär Detektion, Snabbladdningslåda är torr innan den används.

Förberedning av 3M™ Molekylär Detektion, Insats för kylblock

Placera 3M Molekylär Detektion, Insats för kylblock direkt på laboratoriebänken: 3M Molekylär Detektion, Kylblockslåda

används inte. Använd blocket i laboratoriets omgivningstemperatur (20–25°C).

Förberedelse av 3M™ Molekylär Detektion, Insats för värmeblock

Lägg 3M Molekylär Detektion, Insats för värmeblock i en torr dubbelblocksvärmare. Aktivera den torra blockvärmaren och

ställ in temperaturen så att 3M Molekylär Detektion, Insats för Värmeblock tillåts uppnå och bibehålla en temperatur på

100 ± 1°C.

OBSERVERA: Beroende på värmaren tar det cirka 30 minuter för 3M Molekylär Detektion, Insats för värmeblock att

uppnå rätt temperatur. Använd en lämplig, kalibrerad termometer (t.ex. en termometer för delvis nedsänkning eller en

digital värmeelementstermometer, inte en termometer för fullständig nedsänkning) placerad på den avsedda platsen och

kontrollera att 3M Molekylär Detektion, Insats för värmeblock har en temperatur på 100±1°C.

Beredning av 3M™ Molekylärt Detektionsinstrument

1. Öppna 3M™ Molekylär detektionsprogramvara och logga in. Kontakta din 3M-representant för livsmedelssäkerhet för

att säkerställa att du har den senaste versionen av programvaran.

2. Aktivera 3M Molekylärt Detektionsinstrument.

(Svenska)

SV

76

3. Skapa eller redigera en datakörning för varje prov. Se användarhandboken till 3M Molekylärt Detektionssystem för

detaljerad information.

OBSERVERA: 3M Molekylärt Detektionsinstrument måste försättas i redotillstånd innan 3M Molekylär Detektion,

Snabbladdningslåda med reagensrör förs in. Detta uppvärmningssteg tar cirka 20minuter och indikeras av en ORANGE

lampa i instrumentets statusfält. När instrumentet är redo att starta en körning blir statusfältet GRÖNT.

Lysering

Avlägsna nedre delen av 3M Provrörsställ för lyseringslösning med en skruvmejsel innan du placerar det i 3M Molekylär

Detektion, Insats för värmeblock.

1. Låt 3M Lyseringslösningsrör värmas upp genom att placera stället i rumstemperatur (20–25°C) över natten

(16–18timmar). Alternativa metoder för att värma 3M Lyseringslösningsrören till rumstemperatur är att ställa

3MLyseringslösningsrören på laboratoriebänken i minst 2timmar, inkubera 3M Lyseringslösningsrören vid

37±1°Ci1timme eller placera dem i en torr dubbelblockvärmare i 30sekunder vid 100°C.

2. Invertera de lockförsedda rören för att blanda. Fortsätt till nästa steg inom 4 timmar efter invertering.

3. Ta ut det anrikade provet från inkubatorn.

3.1.1 Massera försiktigt botten av anrikningspåsen innan du överför provet till 3M Lyseringslösningsrör.

3.1.2 Ytterligare prov kan krävas för omprövning eller bekräftande steg. Efter uppsamling av provet: Rulla ner

påsen för att minimera huvudutrymmet och förhindra att exponera anrikningen luften. Om en bekräftelse

av presumtiva resultat är nödvändig ska du fortsätta med bekräftande steg så snart som det presumtiva

resultatet erhållits.

4. Ett 3M Lyseringslösningsrör krävs för varje prov och NC-prov (sterilt anrikningsmedel).

4.1 Remsor med 3M Lyseringslösningsrör kan klippas för önskat antal rör. Välj antalet enskilda rör eller remsor

om 8 rör som behövs. Placera 3M Lyseringslösningsrören i ett tomt ställ.

4.2 Undvik korskontaminering genom att öppna ett lock på en remsa med 3M Lyseringslösningsrör i taget och använd

en ny pipettspets vid varje överföringssteg.

4.3 För över det anrikade provet till 3M Lyseringslösningsrören enligt beskrivningen nedan:

För över varje anrikat prov till ett enskilt 3M Lyseringslösningsrör först. Överför NC sist.

4.4 Använd 3M™ Molekylär Detektion, Cap/Decap Redskap - Lysering för att öppna en remsa med

3MLyseringslösningsrör, en remsa i taget.

4.5 Kassera locket till 3M Lyseringslösningsröret - om lysatet ska behållas för omprov ska locken placeras i en ren

behållare för återanvändning efter lysering.

4.5.1 Se bilaga A för information om behandling av förvarat lysat.

4.6 Överför av 20µl prov till ett 3M Lyseringslösningsrör.

5. Upprepa efter behov steg 4.4 till 4.6 för det antal prover som ska testas.

20 µl

6. När alla prover har överförts ska 20µl NC (sterilt anrikningsmedel, t.ex. burat peptonvatten) överföras till ett

3MLyseringslösningsrör. Använd inte vatten som NC.

7. Kontrollera att temperaturen på 3M Molekylär Detektion, Insats för värmeblock är 100±1°C.

(Svenska)

SV

77

8. Placera det oövertäckta stället med 3M Lyseringslösningsrör i 3M Molekylär Detektion, Insats för värmeblock och

värm i 15±1minuter. Under uppvärmningen kommer 3M Lyseringslösningen att ändra färg från rosa (kall) till gul (varm).

8.1 Prover som inte har värmebehandlats korrekt under analysens lyseringssteg bör betraktas som en potentiell

biologisk fara och ska INTE föras in i 3M Molekylärt Detektionsinstrument.

9. Ta ut det oövertäckta stället med 3M Lyseringslösningsrör från 3M Molekylär Detektion, Värmeblock och låt det svalna

i 3M Molekylär Detektion, Insats för kylblock under minst 5minuter men högst 10minuter. 3M Molekylär Detektion,

Insats för kylblock som används vid omgivningstemperatur utan 3M™ Molekylär Detektion, Kylblockslåda ska placeras

direkt på laboratoriebänken. När 3M Lyseringslösningen svalnar återgår dess färg till rosa.

10. Ta ut stället med 3M Lyseringslösningsrör från 3M Molekylär Detektion, Insats för kylblock.

00:15:00

99-101ºC

20-25ºC

00:05:00

Ampliering

1. Ett 3M Molecular Detection Assay 2 - Campylobacter reagensrör krävs för varje prov och för NC-provet.

1.1 Remsorna med rör kan klippas till önskat antal rör. Välj antalet enskilda 3M Molecular Detection Assay 2 -

Campylobacter reagensrör eller remsor om 8 rör som behövs.

1.2 Placera rören i ett tomt ställ.

1.3 Undvik att röra upp reagenspelletsarna i provrörens botten.

2. Välj ett rör för 3M Reagenskontroll och placera det i stället.

3. Undvik korskontaminering genom att öppna ett lock på en remsa med 3M Molecular Detection Assay 2 -

Campylobacter reagensrör i taget och använd en ny pipettspets vid varje överföringssteg.

4. För över varje lysat till ett 3M Molecular Detection Assay 2 - Campylobacter reagensrör och ett rör för

3MReagenskontroll enligt beskrivningen nedan:

Överför varje provlysat till enskilda 3M Molecular Detection Assay 2 - Campylobacter reagensrör först, följt av NC.

Hydrera rör för 3M Reagenskontroll sist.

5. Använd 3M™ Molekylär Detektion, Cap/Decap Redskap - Reagens för att öppna 3M Molecular Detection Assay 2 -

Campylobacter reagensrör - en rörremsa i taget. Kassera locket.

5.1 För över 20µl av provlysat från den övre ½ av vätskan (undvik utfällning) i 3M Lyseringslösningsröret till

motsvarande 3M Molecular Detection Assay 2 -

Campylobacter

reagensrör. Dispensera i en vinkel för att

undvika att pelletsarna rörs upp. Blanda genom att pipettera upp och ned 5 gånger.

5.2 Upprepa steg 5.1 tills enskilda provlysat har lagts till i ett motsvarande 3M Molecular Detection Assay 2 -

Campylobacter reagensrör i remsan.

5.3 Täck 3M Molecular Detection Assay 2 - Campylobacter reagensrör med medföljande extralock och använd den

rundade sidan av 3M Molekylär Detektion, Cap/Decap Redskap - Reagens och pressa fram och tillbaka för att

stänga locket ordentligt.

5.4 Upprepa efter behov steg 5.1 till 5.3 för det antal prover som ska testas.

5.5 När alla provlysat har överförts upprepar du 5.1 till 5.3 för att föra över 20µl NC-lysat i ett 3M Molecular Detection

Assay 2 - Campylobacter reagensrör.

5.6 För över 20 µl av NC-lysat i ett rör för 3M Reagenskontroll. Dispensera i en vinkel för att undvika att pelletsarna

rörs upp. Blanda genom att pipettera upp och ned 5 gånger.

6. Ladda de förslutna provrören i en ren och dekontaminerad 3M Molekylär Detektion, Snabbladdningslåda. Stäng och

lås locket på 3M Molekylär Detektion, Snabbladdningslåda.

20 µL

(Svenska)

SV

78

7. Granska och bekräfta den kongurerade körningen i 3M Molekylär detektionsprogramvara.

8. Klicka på startknappen i programmet och välj vilket instrument som ska användas. Det valda instrumentets lock öppnas

automatiskt.

9. Placera 3M Molekylär Detektion, Snabbladdningslåda i 3M Molekylärt Detektionsinstrument och stäng locket för att

starta analysen. Resultaten ges inom 60 minuter, men positiva resultat kan detekteras tidigare.

10. Ta ut 3M Molekylär Detektion, Snabbladdningslåda från 3M Molekylärt Detektionsinstrument när analysen

har slutförts och kassera rören genom att blötlägga dem i en 1–5% (volym i vatten) blekmedelslösning för

hushållsanvändning i 1 timme på avstånd från analysberedningsområdet.

OBSERVERA: För att minimera risken för falskt positiva resultat på grund av korskontaminering ska reagensprovrör med

amplierad DNA aldrig öppnas. Detta inkluderar rör för 3M Molecular Detection Assay 2 - Campylobacter reagens,

3M Reagenskontroll och 3M Matriskontroll. Kassera alltid förseglade reagensrör genom blötläggning i en 1–5% (volym

ivatten) blekmedelslösning i 1 timme och på avstånd från platsen där analysen förbereds.

Resultat och tolkning

En algoritm tolkar ljusutstrålningskurvan som genereras genom detektion av nukleinsyraampliering. Resultaten analyseras

automatiskt av programmet och färgkodas baserat på resultatet. Ett positivt eller negativt resultat fastställs genom analys

av ett antal unika kurvparametrar. Presumtivt positiva resultat rapporteras i realtid medan resultat som är negativa och

sådana som är märkta Inspektera visas när körningen har slutförts.

Presumtivt positiva resultat bör bekräftas enligt laboratoriets standardrutiner eller genom att följa lämplig bekräftelse från

referensmetoden

(1,2)

, med början med överföringen från den primära 3M Campylobacter Enrichment Broth-anrikningen

till selektiva Campylobacter-plattor med mikroaerol inkubation, åtföljt av bekräftelse av isolater med hjälp av lämpliga

biokemiska, mikroskopiska och serologiska metoder. För bästa möjliga underhåll av anrikningen ska du rulla ner

anrikningspåsen efter insamling av ett prov.

OBSERVERA: Inte ens ett negativt prov kommer att ge ett nollresultat eftersom systemet och amplieringsreagenserna

i3M Molecular Detection Assay 2 - Campylobacter innehåller en tidigare RLU-avläsning.

Skulle ovanlig ljusutstrålning förekomma, vilket är sällsynt, märker algoritmen detta med Inspektera. 3M rekommenderar

att användaren upprepar analysen av prover som resulterar i Inspektera. Om resultatet fortsätter att vara Inspektera ska du

gå vidare till testbekräftelse med den metod du föredrar eller så som anges i lokala föreskrifter

(1,2)

.

Bilaga A. Protokollavbrott: Förvaring och omprovning av värmebehandlade lysater

1. Återförslut 3M Lyseringslösningsröret med ett rent lock (se avsnittet Lysering, 4.5) för att förvara ett värmebehandlat

lysat

2. Förvara vid 2 till 8°C i upp till 72 timmar.

3. Förbered ett förvarat prov för ampliering genom att vända det upp och ned 2–3 gånger så att det blandas.

4. Avlägsna locken från rören.

5. Placera de blandade lysatrören i 3M Molekylär Detektion, Insats för värmeblock och värm vid 100±1°C i 5±1minuter.

6. Ta ut stället med 3M Lyseringslösningsrör från 3M Molekylär Detektion, Värmeblock och låt det svalna i 3M Molekylär

Detektion, Insats för kylblock under minst 5minuter men högst 10minuter.

7. Fortsätt enligt protokollet i avsnittet Ampliering som beskrivs ovan.

(Svenska)

SV

Sidan laddas ...

3M Molecular Detection Assay 2 - Campylobacter MDA2CAM96, 96 tests, 1 ea Bruksanvisningar

3M Molecular Detection Assay 2 - Campylobacter MDA2CAM96, 96 tests, 1 ea Bruksanvisningar

på andra språk

Relaterade papper

Andra dokument