Thermo Fisher Scientific MarrowMAX Bone Marrow Medium Bruksanvisningar
- Typ
- Bruksanvisningar
MarrowMAX™ Bone Marrow Medium
Katalognummer12260-014, 12260-001, 12260-097, 12260-098
Utg.nr MAN0028659 Rev. A.0
VARNING! Läs säkerhetsdatabladen (SDB:erna) och följ hanteringsanvisningarna. Använd lämpliga skyddsglasögon,
skyddskläder och skyddshandskar. Säkerhetsdatablad (SDB:er) kan hämtas från thermofisher.com/support.
Avsedd användning
MarrowMAX™ Bone Marrow Medium är kvalificerad för in vitro-förökning av primära kulturer av mänsklig benmärg, perifert blod och andra
hematopoetiska celler för cytogenetiska studier och in vitro-diagnostiska (IVD) procedurer för hematologisk sjukdom.
Cytogenetiska produkter är för professionellt bruk. De används i medicinska laboratorier av personal som har fått specialiserad utbildning
och träning med avseende på procedurer som använder IVD-produkter. IVD-produkter av denna typ är inte avsedda som den enda
avgörande faktorn i en diagnostisk situation. Testresultat tolkas av en sjukvårdspersonal som en del av den kliniska behandlingen av en
patient.
Princip och förklaring av tillvägagångssätt
• Benmärg tillhandahåller en källa till mononukleära benmärgsceller, som används vid diagnostisk testning av hematologiska
sjukdomar.
• MarrowMAX™ Bone Marrow Medium har optimerats för att maximera kolonifästet, tillväxthastigheter och för att ge rikligt metafasiskt
utbyte. MarrowMAX™ Bone Marrow Medium är ett optimerat RPMI 1640-medium, kompletterat med fetalt bovint serum (FBS),
gentamicin och L-glutamin. Den innehåller också ett nytt humant stromalcellskonditionerat medium som består av en unik blandning
av hematopoetiska tillväxtfaktorer. MarrowMAX™ Bone Marrow Medium innehåller inte GCT-konditionerat medium och är ett
näringsmässigt komplett medium som inte kräver ytterligare tillskott.
• Denna produkt är sterilfiltrerad.
Innehåll och förvaring
Alla testresultat för kvalitetskontroll rapporteras på ett partispecifikt analyscertifikat som finns tillgängligt på vår webbplats:
thermofisher.com.
Produkt Kat.nr Förvaring Hållbarhetstid[1]
MarrowMAX™ Bone Marrow Medium:
• 100 mL
• 500 mL
• 10 × 500mL
• 20 × 100mL
•12260-014
•12260-001
•12260-097
•12260-098
Skydda från ljus;
-20 °C till -5 °C 18 månader
[1] Hållbarheten bestäms utifrån tillverkningsdatum. Använd inte utanför det märkta utgångsdatumet.
BRUKSANVISNING
För in vitro-diagnostik.
Relaterat material
Om inte annat anges är alla material tillgängliga från
thermofisher.com. "MLS" betyder att materialet är tillgängligt
från fisherscientific.com eller från en annan större leverantör av
laboratorietillbehör.
Informationspunkt Källa
KaryoMAX™ Colcemid™-lösning, flytande (10 µg/mL), i
HBSS 15210040
KaryoMAX™ Colcemid™-lösning, flytande (10 µg/mL), i
PBS 15212012
KaryoMAX™ Giemsa-färglösningför stamlösning 10092013
Gurrbuert-tabletter (pH 6,8) 10582013
Amfotericin B 614122500
KaryoMAX™ kaliumkloridlösning 105750
Trypsin 2,5%, inget fenolrött 150900
Nunc™ cellkulturbehandlade multiskålar, 6-brunnar 140675
Nunc™ 15 mL koniska sterila polypropencentrifugrör 339651
Nunc™ 50 mL koniska sterila polypropencentrifugrör 339653
Nunc™ Thermanox™ täckglas (25 mm) 174985
Nunc™ serologiska pipetter (5 mL) 170355
Försiktighetsåtgärder
Använd inte produkten om förpackningen, inklusive flaskor, har
äventyrats och/eller visar tecken på mikrobiell kontaminering,
grumligt utseende, missfärgning, uttorkning, sprickbildning eller
andra tecken på försämring. MarrowMAX™ Bone Marrow Medium
bör tas emot fryst; därför är en upptinad produkt en indikation på
en komprometterad produkt.
OBSERVERA! Human benmärg är biologiskt farligt.
Följ vanliga försiktighetsåtgärder för hantering, lagring
och kassering.
OBSERVERA! Använd inte för injektion eller infusion!
Rapportera alla allvarliga incidenter i samband med
enheten till tillverkaren och den behöriga myndigheten i
den EU-medlemsstat där användaren och/eller patienten
är etablerad.
Riktlinjer för användning
• Använd alltid korrekt aseptisk teknik och arbeta inuti en
laminär flödeshuv. Rådfråga vår Gibco Cell Culture Basics
för aseptisk hantering.
• Utför alla inkubationer i en fuktad 37 °C, 5 % CO2-inkubator
om inget annat anges.
Riktlinjer för MarrowMAX™ Bone Marrow Medium
• MarrowMAX™ Bone Marrow Medium levereras fryst, redo att
användas vid upptining.
• Tina vid 2–8 °C och blanda sedan försiktigt för att säkerställa
homogenitet. Tina inte vid 37 °C. Detta kan resultera i
bildning av en fällning och bör undvikas.
• MarrowMAX™ Bone Marrow Medium innehåller fetalt bovint
serum (FBS); sammanklumpat skräp kan utvecklas vid
upptining och lagring.
• Upptinad, oöppnad MarrowMAX™ Bone Marrow Medium kan
förvaras skyddad från ljus vid 2–8 °C i upp till två månader
inom det märkta utgångsdatumet.
• När den öppnats, använd produkterna till MarrowMAX™
Bone Marrow Medium inom 10 dagar för maximal
tillväxtprestanda.
• Undvik upprepad uppvärmning/kylning och långvarig
exponering för ljus.
• Använd inte utanför det märkta utgångsdatumet.
Odla benmärgsprover för cytogenetisk analys
1. Använd lämplig mängd benmärg, baserat på patientens
antal vita blodkroppar, för att inokulera 6-brunnars
vävnadsodlingsbehandlade plattor (Nunc™ kat.nr140675)
med 5 mL av MarrowMAX™ Bone Marrow Medium (1 x 106
celler/mL).
2. Inkubera kulturerna i 24 timmar i en fuktad inkubator vid 37
°C och 5 % CO2.
3. För de sista 1–2 timmarna av inkubationen, tillsätt 0,05
µg/mL KaryoMAX™ Colcemid™-lösning (kat.nr15210040 eller
kat.nr 15212012) till varje kulturbrunn, rotera sedan försiktigt
skålen för att blanda.
4. Överför volymen av varje benmärgskulturbrunn till ett 15
mL koniskt rör (kat.nr339651), och centrifugera sedan i 5
minuter vid 300 ×g.
5. Ta bort supernatanten, resuspendera pelleten och inkubera
sedan i 15 minuter vid rumstemperatur med 10 mL
0,068 M KCl (KaryoMAX™ kaliumkloridlösning kat.nr105750)
uppvärmd till 37 °C.
6. Tillsätt försiktigt 0,5 mL färskt 3:1 metanol/isättikafixativ och
centrifugera sedan vid 300 ×g i 5 minuter.
7. Ta bort supernatanten och resuspendera sedan pelleten i
fixativ i 10 minuter vid rumstemperatur.
8. Upprepa steg7 tre gånger, resuspendera sedan pelleten i
0,5 mL kylt fixativ.
9. Pipettera 35µL av cellsuspensionen på ett vått
mikroskopiskt provglas och sprid sedan ut för
kromosomanalys.
10. Färga provglasen för kromosomanalys enligt ditt eget
laboratoriums metoder för färglösning.
2Bruksanvisning för MarrowMAX™ Bone Marrow Medium
Färglösning med Giemsa-färglösning
Bandning av kromosomer med enzymer och färglösningar
är avgörande för att identifiera normala och onormala
kromosomstrukturer.
1. Förbered sex Coplin-burkar enligt följande tabell:
Burknummer Innehåll
1 0,125 % trypsin/0,9 % NaCl-blandning
2 0,9 % NaCl för sköljning
3 0,9 % NaCl för sköljning
4Gurr Giemsa-färglösning (R66) blandad med Gurr
6,8 buert och aceton
5 Gurr 6,8 buert för sköljning
6 Gurr 6,8 buert för sköljning
2. Placera ett provglas under en föreskriven tid i burken som
innehåller trypsinet/NaCl-blandningen (burk 1).
Denna tid kan vara så kort som 10sekunder eller så lång
som 2 minuter, beroende på aktivitetsnivån för trypsinet som
används.
3. När trypsintiden har förflutit, ta bort provglaset och
skölj sedan genom sekventiell doppning i 0,9 % NaCl-
sköljburkarna (burk 2 och 3).
4. Placera provglaset i färglösningsburken (burk 4) som
innehåller Gurrfärglösningen och buerten i 5 minuter.
Denna tid kan variera beroende på styrkan på den använda
färglösningen.
5. Ta bort provglaset från burken och skölj sedan genom att
sekventiell doppning i de två sköljburkarna för Gurrbuert
(burk 5 och 6).
6. Ta bort provglaset från den sista sköljningen för att lufttorka,
och täck sedan provglaset med Cytoseal™60.
Den får torka i ugnen (50 °C) varefter den är redo för
metafasskanning under mikroskopet.
Kvalitetssäkring/-kontroll
Varje massa MarrowMAX™ Bone Marrow Medium
är prestandatestad av ett certifierat amerikanskt
referenscytogenetiklaboratorium för att säkerställa konsekvent
överlägsen prestanda. Benmärgsceller från aspiratet från en
normal vuxen donator odlas i 24 timmar i MarrowMAX™ Bone
Marrow Medium innan det mitotiska indexet och upplösningen
av kromosombandning mäts. Dessutom testas varje parti med
avseende på pH och osmolalitet och måste klara ett sterilitetstest
innan partiet släpps.
Märkning av symboler
Symbolerna på bruksanvisningen och etiketter som inte är globalt
erkända enligt ISO 15223 förklaras i följande tabell.
LÄS SÄKERHETSDATABLAD (SDB) Se säkerhetsdatabla
det (SDB) för risker förknippade med produkten.
UKRP AUKTORISERAD REPRESENTANT I STORBRITANNIEN
Begränsad produktgaranti
Life Technologies Corporation och/eller dess dotterbolag
garanterar sina produkter i enlighet med Life
Technologies allmänna villkor och försäljningsvillkor
på www.thermofisher.com/us/en/home/global/terms-and-
conditions.html. Vid frågor, var god kontakta Life Technologies
på www.thermofisher.com/support.
Bruksanvisning för MarrowMAX™ Bone Marrow Medium 3
UKRP
Life Technologies Ltd 3 Fountain Drive Inchinnan
Business Park Paisley PA49RF Scotland, United
Kingdom
Life Technologies Europe B.V. Kwartsweg 2,
2665 NN Bleiswijk The Netherlands Life Technologies Corporation | 3175 Staley
Road | Grand Island, New York 14072 USA
Översatt från engelska, från utgivningsnummer MAN0018525 E.0.
Revisionshistorik:Utg.nrMAN0018525 E.0
Revision Datum Beskrivning
E.0 12 juni 2023 Ändrade förvaringsförhållanden till -20 °C till -5 °C.
D.0 26 januari 2023 Uppdaterad tillverkningsadress till Paisley. Borttagen UKCA-symbol. Mindre redigeringar
C.0 9 augusti 2022 Katalognummer lades till och mindre korrigeringar gjordes i produktinformationsbladet.
B.0 4 mars 2020 EC-Rep-adressen har uppdaterats.
A.0 15 mars 2019 Första utgåvan.
Informationen i den här manualen kan ändras utan meddelande.
ANSVARSFRISKRIVNING: OM INTE FÖRHINDRADE ENLIGT LAG SKA THERMO FISHER SCIENTIFIC INC. OCH/ELLER DESS DOTTERBOLAG INTE HÅLLAS SKYLDIGA FÖR
SÄRSKILDA, OFÖRUTSEDDA, INDIREKTA, STRAFF- ELLER FÖLJDSKADOR SOM KAN UPPSTÅ I SAMBAND MED DETTA DOKUMENT ELLER DIN ANVÄNDNING AV DETSAMMA.
Viktig licensinformation: Denna produkt kan vara täckt av en eller flera licenser för begränsad användning. Genom att använda denna produkt godkänner du avtalen och villkoren för
alla tillämpliga licenser för begränsad användning.
©2019-2023 Thermo Fisher Scientific Inc. Med ensamrätt. Alla varumärken tillhör Thermo Fisher Scientific och dess dotterbolag om inte annat anges.
thermofisher.com/support|thermofisher.com/askaquestion
thermofisher.com
3 augusti 2023
-
1
-
2
-
3
-
4
